Система високоефективного рідинного хроматографа (HPLC) є важливою галуззю хроматографії та є незамінною технологією розділення та аналізу в галузях сучасної хімії, медицини, промисловості, сільського господарства, інспекції товарів і судової інспекції. Він використовує рідину як рухому фазу та використовує інфузійну систему високого тиску для закачування одного розчинника з різною полярністю або змішаних розчинників, буферів тощо в хроматографічну колонку, оснащену високоефективною стаціонарною фазою. Після того, як компоненти в колонці розділені, вони потрапляють в детектор для виявлення, завдяки чому досягається ефективний, швидкий і чутливий аналіз зразка.
Структурні компоненти
Система високоефективної рідинної хроматографії в основному включає резервуари для зберігання рідини, інфузійні насоси високого тиску, пробовідбірники, хроматографічні колонки, детектори, реєстратори та пристрої обробки даних. Серед них інфузійний насос високого тиску є одним із основних компонентів усієї системи, який відповідає за надсилання рухомої фази в хроматографічну колонку зі стабільним тиском і потоком. Хроматографічна колонка є ключовим компонентом розділення, заповнена нерухомою фазою з надзвичайно дрібними частинками. Коефіцієнти розподілу різних сполук між нерухомою фазою та рухомою фазою різні, завдяки чому досягається поділ. Детектор перетворює розділені компоненти в електричні сигнали та виводить графік і результати через реєстратор і пристрій обробки даних.
Як це працює
Принцип роботи системи високоефективної рідинної хроматографії заснований на принципі розділення хроматографії, тобто коли кожен компонент, розчинений у рухомій фазі, проходить через нерухому фазу, він має різні розміри та силу взаємодії з нерухомою фазою (адсорбція, розподіл, виключення та спорідненість), а час перебування в нерухомій фазі різний, тому він витікає з нерухомої фази один після інший. Зокрема, насос високого тиску проникає в систему через рухливу фазу в резервуарі для зберігання рідини, а розчин зразка потрапляє в рухому фазу через інжектор і завантажується в хроматографічну колонку, коли рухома фаза тече. Оскільки коефіцієнти розподілу компонентів у розчині зразка різні в рухомій фазі та нерухомій фазі, коли дві фази переміщуються відносно одна одної, після безперервного процесу розподілу адсорбції-десорбції відстань між змішаними компонентами поступово розширюється, і, нарешті, витікає з колонки послідовно як окремі окремі компоненти. Детектор перетворює концентрацію зразка в електричний сигнал і передає його на реєстратор, щоб роздрукувати дані зразка у вигляді графіка.
Переваги та застосування
Система високоефективної рідинної хроматографії має такі характеристики, як висока ефективність розділення, висока швидкість аналізу, хороша чутливість виявлення та здатність аналізувати та відокремлювати термічно нестабільні фізіологічно активні речовини з високими температурами кипіння, які не можуть випаровуватися. Сфера його застосування широка і практично не обмежується леткістю і термостійкістю аналітичних об'єктів. Майже всі сполуки, включно з високою температурою кипіння, полярністю, іонними сполуками та високомолекулярними речовинами, можна аналізувати та визначати за допомогою високоефективної рідинної хроматографії. Системи високоефективної рідинної хроматографії широко використовуються в галузі фармації, традиційної китайської медицини та традиційної китайської медицини, харчової науки та технологій для аналізу ліків, дослідження відбитків пальців китайської медицини, виявлення залишків пестицидів, аналізу поживних компонентів їжі тощо.
Тенденції розвитку
Зі швидким розвитком сучасної біотехнології та фармацевтичної промисловості системи високоефективної рідинної хроматографії також постійно розвиваються та вдосконалюються. Поточна тенденція розвитку полягає в тому, щоб схилитися до біохімічного аналізу та аналізу ліків і підготовки, а також до розробки більш ефективних, чутливих і швидких методів розділення та аналізу. У той же час, у відповідь на проблеми високого споживання та токсичності рухомих фаз, також активно досліджуються екологічно чисті та стійкі альтернативи.
Підводячи підсумок, системи високоефективної рідинної хроматографії відіграють усе більш важливу роль у сфері сучасної науки та техніки завдяки своїм унікальним можливостям розділення та аналізу та широким перспективам застосування.
